实体瘤CAR-T细胞治疗,CAR-T细胞疗法,CAR-T细胞免疫治疗新技术MUC1 CAR-T
CAR-T细胞治疗
提到CAR-T疗法，有些人可能想到的就是抽取几管血，分离其中的免疫细胞，在体外进行扩增和改良，然后再回输给癌症患者体内。乍一听觉得CAR-T疗法很神奇，甚至有些天方夜谭。其实这一疗法并不简单，对于部分血液肿瘤患者来说，CAR-T疗法确实非常有效。
自2017年此疗法在欧美上市以来，就好消息不断，对于极端难治性白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤患者更是雪中送炭。有“CAR-T代言人”之称的第一例接受CAR-T治疗的儿童白血病患儿，Emily Whitehead，至今已经无瘤生存快8年了。
2019年的Emily(无癌7年)
CAR-T疗法开发者Carl June博士同Emily参加活动
CAR-T细胞疗法之所以在血液瘤中的疗效显著，全都得意于血液瘤的肿瘤细胞有着祖传的靶点——CD19(只存于肿瘤细胞中而不存在于正常细胞)，在治疗中可以依靠此靶点带领CAR-T细胞找到并消灭癌细胞。PBCAR269A是Precision公司的第三种同种异体嵌合抗原受体CAR-T细胞疗法的候选药物，用于治疗靶向BCMA靶点的多发性骨髓瘤(蓝鸟公司)。该疗法计划在今年展开I期临床试验。
然而，实体瘤中并没有那么明显的只存在于癌细胞中而不存在于正常细胞中的靶点。因此一直以来，CAR-T细胞在治疗实体瘤中的临床疗效不佳。医学界一直希望CAR T细胞可以为更多的实体肿瘤开发出新的特异性靶点!
目前，随着CAR-T代数的更迭，CAR-T在增殖、细胞因子释放等方面有了明显改进，这一技术终于破冰，越来越多的临床试验开始尝试将CAR-T细胞疗法用于实体瘤。今天小编主要讲的是针对靶点MUC1抗原的新型CAR-T细胞疗法在实体瘤方面的国内外研究进展。
发挥巨大治疗潜力!MUC1 CAR-T剑指头颈癌
2020年1月，《Cancer Medicine(癌症医学)》杂志发表的一项关于以MUC1作为靶点的CAR-T疗法对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的治疗效果。研究表明，这项新型CAR-T细胞疗法能够在体内诱导HNSCC的肿瘤降解，证实CAR-T在治疗HNSCC患者中的潜在有效性。
头颈癌是世界上发病率位居第6的癌症，其中鳞状细胞癌是主要的病理类型。随着目前治疗方法的改进，头颈部鳞状细胞癌的预后仍然不理想。HNSCC的临床治疗主要包括手术、放疗和化疗。外科手术和化疗通常用于癌症复发和转移的患者，但是预后仍然不利。
西妥昔单抗是美国食品药品监督管理局(FDA)批准的首个针对HNSCC的靶向药物，是针对表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体(mAb)。在铂类化学疗法(例如顺铂)中加入西妥昔单抗可将患者的生存率略微提高2.7个月，使相对死亡风险降低20%。仅用顺铂治疗已复发或转移的HNSCC患者预后较差，一年存活率不到5%。因此，需要可以改善头颈部鳞状细胞癌患者预后的新疗法。
MUC1属于粘蛋白家族，通常在多种上皮细胞类型中表达。它通常在肿瘤转化过程中过表达，可能是糖基化变化的结果。粘蛋白在维持体内平衡和促进细胞存活中起着核心作用。MUC1的表达不仅限于细胞膜，还可以在细胞质中表达，这使肿瘤细胞和非肿瘤细胞变得更加容易区分，使靶向治疗更加精确。
目前，靶向MUC1的CAR-T细胞已成功用于非小细胞肺癌，乳腺癌12以及晚期难治性实体瘤患者的临床试验(NCT02587689)。此外，与邻近的非肿瘤组织相比，MUC1在HNSCC组织中的表达更高。
IL22是属于IL10家族的细胞因子，并且优先在Th17细胞的亚群中表达。IL22由高水平的CD4 T细胞和低水平的NK细胞产生。在某些免疫抑制性疾病如间质性肺病等中可见到这种细胞因子的增加。HNSCC是一种免疫抑制性疾病，具有炎性肿瘤微环境，据报道，外源添加人IL22重组蛋白可以增加MUC1在肿瘤炎性微环境中的表达。
因此，中国研究人员首先构建了第二代CAR，并在体外验证了细胞毒性功能，随后发现外源添加人IL22重组蛋白可以增加MUC1表达并增强T细胞的功能，因此，研究人员又再次构建分泌IL22的第四代CAR，结果发现CAR-MUC1-IL22 T细胞对MUC1 + HNSCC细胞具有更强、更有效的细胞毒性功能，这些发现可以设计出更安全、有效的CAR-T细胞，以便将来为HNSCC患者带来 治疗。
图示CAR-T细胞可在体内诱导HNSCC的肿瘤降解，图中红蓝色为小鼠肿瘤
另辟蹊径，MUC1 CAR-T疗法显著抑制乳腺癌的生长
1、MUC28z CAR-T细胞疗法：三阴性乳腺癌
2019年5月24日，北卡罗来纳大学夏洛特分校研究人员在《Immunol》杂志上公布了在异种移植模型中，单剂量的MUC28z CAR-T细胞可显著抑制三阴性乳腺癌(TNBC)肿瘤的生长的临床研究。
超过90%的乳腺癌患者中，MUC1过表达且糖基化异常。所以与肿瘤相关的MUC1是侵袭性表型的标志物，并用作靶向免疫治疗的肿瘤新抗原。因此，研究人员采用TAB004(一种高度特异性地针对tMUC1的单克隆抗体)工程MUC28z(一种嵌合抗原受体)融合分子来生成CAR T细胞，并对这些T细胞进行了表型和功能分析，结果发现MUC28z CAR-T细胞不管是在小鼠体内还是体外均能够有效抑制TNBC肿瘤的生长，具有针对tMUC1阳性TNBC肿瘤的高治疗潜力，并且对正常乳腺上皮细胞的损害较小。
由于tMUC1在包括胰腺导管腺癌和多种乳腺癌亚型在内的大多数上皮来源的实体瘤中广泛表达，因此MUC28z CAR-T细胞可能会在靶向实体瘤方面广泛应用。
图示MUC28z CAR T细胞以抗原依赖性方式在体外裂解TNBC肿瘤细胞
图示MUC28z CAR T细胞具有体内缩小HCC70肿瘤的长期疗效
2、huMNC2-CAR44 T细胞疗法：转移性乳腺癌
2019年6月24日，Minerva Biotechnologies(一家生物制药公司，专注于开发癌症免疫疗法)宣布，美国FDA已批准huMNC2-CAR44 T细胞疗法的研究性新药申请(IND)，将对huMNC2-CAR44用于转移性乳腺癌进行临床试验，其靶向乳腺癌中MUC1(存在于超过75%的实体瘤癌细胞中)裂解产物MUC1 *生长因子受体。
之前针对MUC1的癌症疗法的尝试都失败了，因为它们是以全长的MUC1中在肿瘤细胞上被切割然后脱落并从癌细胞表面释放的那一部分为靶点。Minerva对仍然存在于癌细胞的部分MUC1(MUC1 *)、其活化配体和下一代CAR-T技术方面展开广泛专利布局。
MUC1靶点的发现推动了CAR-T细胞疗法在实体瘤中应用的进展，国内博生吉、荣泽生物等专注于细胞、免疫疗法的公司在针对MUC1靶点的CAR-T细胞疗法中也取得了不错的成果。
Minerva打算在2019年底之前开始乳腺癌的临床试验。“我们很高兴我们很快就能开始转移性乳腺癌的人体临床试验，”Minerva首席执行官Cynthia Bamdad博士说。“超过95%的乳腺癌呈MUC1 *呈阳性，这种癌症免疫疗法有可能为数千名与这种可怕疾病作斗争的患者带来希望。”
MUC1 CAR-T疗法在晚期精囊癌方面有成功案例
此外，2016年发表于《Science China》上的一篇I期临床试验表明，以MUC1为靶点的CAR-T细胞疗法在治疗晚期精囊癌方面也有成功案例，下图是治疗前后的B超图像。
图A中灰色超声显示有一个明确的异质性肿瘤，回声区(箭头)显示治疗前肿瘤内部坏死，选择低回声区(箭头)注射CAR-T细胞。图B表示在实时超声引导下，注射针头准确地插入靶区。箭头显示由注射的CAR-T细胞引起的凸面回声音。图C表示注射CAR-T细胞21d后，灰阶超声显示注射部位无回声(箭头所示)，提示肿瘤细胞坏死。
图片6
机不可失，众多CAR-T疗法临床招募进行中
除了上述突破性的临床研究进展，目前国内各大医院正在积极进行各类肿瘤的CAR-T临床研究。
在细胞疗法出现之前,包括晚期胃腺癌、胰腺癌在内的实体瘤通常是采用手术、放化疗进行治疗,其中胃腺癌的发生率占胃恶性肿瘤的95%,胰腺癌更是常见肿瘤中恶性程度最高的肿瘤,中位生存期和5年生存率都远远低于其他肿瘤,号称“癌中之王”。但是大部分患者术后会出现局部复发或转移,另外,这类恶性肿瘤对放化疗的敏感性也不高。所以基于目前的标准疗法,治疗效果并不理想,而且预后极差。免疫疗法的出现，将给更多的晚期患者带来长期生存的希望和奇迹。
我们坚信，在完善的细胞免疫监管制度出台后，国家将放开细胞免疫治疗的大门造福更多的癌症患者，我们国家的细胞免疫疗法也将登上国际舞台!
参考文献
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/cam4.2733
https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs11427-016-5024-7
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26961900
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31800160
https://www.biospace.com/article/releases/minerva-biotechnologies-announces-fda-acceptance-of-ind-application-for-humnc2-car44-t-cells-to-treat-metastatic-breast-cancer/
https://www.firstwordpharma.com/node/1649108#axzz5rpYDX3hI
